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上海纤检仪器有限公司介绍几种蛋白测定方法

导读:上海纤检仪器有限公司在下文介绍了测量蛋白质的其他方法,供大家交流和学习。


返回列表 来源:未知 发布日期:2019-08-26 16:06【
上海纤检仪器有限公司主要生产定氮仪和消化炉,脂肪测定仪还有其他分析仪器,上海纤检仪器用的方法,主要是凯式定氮法,那么除了这种方法外,还有哪几种可以测定蛋白质的方法,下面,上海纤检仪器有限公司介绍如下:

一、就是大家熟悉的杜马斯定氮法
杜马斯定氮法其测定原理为:样品在900-1200摄氏度高温下燃烧,燃烧过程中产生混合气体,其中的干扰成分被一系列适当的吸收剂所吸收,混合气体中的氮氧化合物被全部还原成分子氮,随后氮的含量被热导检测器检测,然后计算。
 
二、近红外光谱法
红外光谱法测定由食品或其他物质中分子引起的辐射吸收然后通过数学模型来计算其含有的某些分子的含量。食品谷物中不同的官能团吸收不同频率的辐射。近红外波段的特征吸收可用于测定食品中的蛋白质含量。针对所要测的成分,用近红外波长的光辐射食品,通过测定样品反射或透射光的能量可以预测其成分的浓度。
 
三、 双缩脲法
当脲被小心地加热至150-160摄氏度时,可由两个分子间脱去一个氨分子而生成二缩脲,也叫双缩脲,双缩脲与碱及少量硫酸铜溶液作用生成紫红色的配合物,此反应称为双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有肽键,与双缩脲结构相似,故也能呈现此反应而生成紫红色配合物,在一定条件下其颜色深浅与蛋白质含量成正比,据此可用吸光度法来测蛋白质含量,该配合物的最大吸收波长为560nm。
 
四、 紫外吸收法 
蛋白质及其降解产物的芳香环残疾,在紫外区内对一定波长的光具有选择性吸收作用。在次波长下(280nm),光吸收程度与蛋白质浓度成直线关系,因此,通过测定蛋白质溶液的吸光度,并参照事先用凯氏定氮法测定蛋白质含量的标准样所做的标准曲线,即可求出样品蛋白质含量。
 
考马斯亮蓝G-250是一种蛋白质染料,与蛋白质通过范德华力结合,使蛋白质染色,在620nm处有最大吸收,可用于蛋白质的定量测定。此法简单而快速,适合大量样品的测定。
 
六、 水杨酸比色法
样品中的蛋白质经硫酸消化而转化成铵盐溶液后,在一定的温度和酸度条件下可与水杨酸钠和次氯酸钠作用生成蓝色化合物,可以在波长660nm处比色测定,求出样品含氮量,进而计算出蛋白质含量。
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