酶标仪法如何测定林可霉素？

导读:上海纤检仪器有限公司建立酶标仪法测定微孔板发酵液中林可霉素的含量。

来源：未知发布日期：2019-09-12 13:49【大中小】

上海纤检仪器有限公司了解到关于林可霉素的测定，近年来国内外有胶体金免疫层析法、高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱串联质谱法(LC.MS/MS)、流动注射一化学发光分析法、旋光法等。但以上方法大多成本高、周期长、操作复杂，不宜用于大批量样品的检测。酶标仪和分光光度计满足吸光物质浓度在一定波长下与吸光度成线性相关的规律，是实验室常用的设备，都适用于物质的检测定量分析。但分光光度计相对于酶标仪定量检测物质操作复杂，效率低，试剂用量大，尤其是大批量样品的快速检。本实验上海纤检仪器有限公司通过酶标仪法测定微孔板发酵液中林可霉素的含量，并利用Origin8.6软件与分光光度计法进行了拟合，显示两种方法具有很好的一致性，为后续高通量选育林可霉素高产菌株奠定了基础。

1仪器
酶标仪，上海纤检仪器有限公司；常温室压等离子诱变系统(ARTP)，北京思清源生物科技有限公司；单道、八道手动可调移液器，Sartofius；TU一1810紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；HTS．T008 Canvic甘薇深孔板摇床，上海甘薇生物科技有限公司。

2林可霉素测定原理及方法实验
原理：在酸性条件下林可霉素与氯化钯能够形成有色络合物，随着林可霉素浓度的增大该络合物的颜色逐渐加深，在一定的波长下可以使用酶标仪定量检测林可霉素的浓度。
分光光度计法：测定样品中林可霉素含量。
酶标仪法：吸取发酵液l50“L，依次加入0.02mol/L氯化钯溶液1509L，用lmol/L盐酸定容至lmL，放置30min，吸取反应液1009L至酶标板，以不含林可霉素空白溶液为对照，在380nm波长处测定其吸光度。

3结论
本实验上海纤检仪器有限公司采用酶标仪法检测微孔板发酵液中林可霉素的含量并优化了该方法的主要影响因素，同时检测了该方法的精密度，结果显示该方法对于检测微孔板发酵液中林可霉素的含量具有很好的可靠性；本实验还利用Origin 8.6软件对酶标仪法与分光光度计法测定发酵液中林可霉素的含量进行曲线拟合，显示两种方法具有很好的相关性；酶标仪法可以用于大批量样品的快速检测，为后续高通量选育林可霉素高产菌株奠定了基础。

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